Trong hóa học, pha loãng là quá trình làm giảm nồng độ của một chất trong dung dịch. Pha loãng theo chuỗi là việc pha loãng nhiều lần dung dịch để tăng nhanh hệ số pha loãng. Quy trình này thường được thực hiện trong các thí nghiệm yêu cầu dung dịch rất loãng với độ chính xác cao. Ví dụ các thí nghiệm liên quan đến đường cong nồng độ trên thang logarit hoặc các thí nghiệm để xác định mật độ vi khuẩn. Dung dịch pha loãng chuỗi được sử dụng rộng rãi trong các thí nghiệm khoa học như hóa sinh, vi sinh, dược lý và vật lý.
Bươc chân
Phương pháp 1/2: Thực hiện pha loãng cơ bản
Bước 1. Xác định dung dịch pha loãng thích hợp
Điều rất quan trọng là xác định chất lỏng được sử dụng để pha loãng. Nhiều dung dịch có thể hòa tan trong nước cất, nhưng điều này không phải lúc nào cũng đúng. Nếu bạn đang pha loãng vi khuẩn hoặc các tế bào khác, hãy làm như vậy trên môi trường nuôi cấy. Chất lỏng bạn chọn sẽ được sử dụng cho tất cả các dung dịch pha loãng chuỗi.
Nếu nghi ngờ về việc sử dụng chất pha loãng nào, hãy tìm kiếm sự trợ giúp hoặc tìm kiếm trực tuyến. Tìm kiếm ví dụ từ những người khác đã thực hiện pha loãng chuỗi tương tự
Bước 2. Chuẩn bị một số ống nghiệm chứa 9 mL chất pha loãng
Ống nghiệm được sử dụng cho các dung dịch pha loãng rỗng. Đầu tiên, cho mẫu chưa pha loãng vào ống đầu tiên, sau đó thực hiện lần lượt các độ pha loãng sang các ống tiếp theo.
- Dán nhãn tất cả các ống được sử dụng trước khi bắt đầu pha loãng để bạn không bị nhầm lẫn khi thí nghiệm đang chạy.
- Mỗi ống sẽ được đổ đầy 10 dung dịch pha loãng, bắt đầu từ ống có chất chưa được pha loãng. Độ pha loãng trong ống đầu tiên là 1:10, tiếp theo là 1: 100 trong ống thứ hai, 1: 1000 cho ống thứ ba, v.v. Xác định lượng pha loãng phải được thực hiện trước, để bạn không lãng phí dung dịch pha loãng.
Bước 3. Chuẩn bị một ống nghiệm chứa ít nhất 2 mL dung dịch chưa pha loãng
Lượng dung dịch cần pha loãng tối thiểu để thực hiện pha loãng chuỗi này là 1 mL. Nếu bạn chỉ sử dụng 1 mL, sẽ không còn lại dung dịch chưa pha loãng. Gắn nhãn BLM cho các dung dịch không pha loãng.
Trộn kỹ dung dịch trước khi bắt đầu pha loãng
Bước 4. Thực hiện pha loãng đầu tiên
Dùng pipet lấy 1 mL dung dịch chưa pha loãng từ ống nghiệm BLM và cho vào ống nghiệm có ghi nhãn 1:10 chứa 9 mL chất pha loãng, sau đó lắc kỹ. Bây giờ có 1 mL dung dịch chưa pha loãng trong 9 mL chất pha loãng. Do đó, dung dịch đã được pha loãng bởi hệ số pha loãng 10.
Bước 5. Thực hiện pha loãng thứ hai
Đối với lần pha loãng thứ hai, lấy 1 mL dung dịch từ ống 1:10, sau đó cho vào ống 1: 100 cũng chứa 9 mL chất pha loãng. Đảm bảo rằng dung dịch trong ống 1:10 được trộn hoàn toàn trước khi thêm vào ống tiếp theo. Một lần nữa, hãy đảm bảo rằng dung dịch pha loãng trong ống 1: 100 được trộn hoàn toàn. Dung dịch từ ống 1:10 được pha loãng 10 lần trong ống 1: 100.
Bước 6. Tiếp tục quy trình này để thực hiện pha loãng chuỗi dài hơn
Quá trình này có thể được lặp lại nhiều lần nếu cần để thu được nồng độ dung dịch mong muốn. Trong các thí nghiệm sử dụng đường cong nồng độ, bạn có thể thực hiện pha loãng chuỗi để tạo ra một số dung dịch có độ pha loãng 1, 1:10, 1: 100, 1: 1.000.
Phương pháp 2/2: Tính hệ số pha loãng và nồng độ cuối cùng
Bước 1. Tính tỷ lệ của độ pha loãng cuối cùng trong độ pha loãng của chuỗi
Tổng tỷ lệ pha loãng có thể được xác định bằng cách nhân hệ số pha loãng từ mỗi bước đến bước cuối cùng. Hình minh họa toán học có công thức DNS = D1 x D2 x D3 x… x D , NSNS là hệ số pha loãng tổng và D là tỷ lệ chất pha loãng.
- Ví dụ, giả sử bạn pha loãng 1:10 4 lần. Thêm hệ số pha loãng vào công thức: DNS = 10 x 10 x 10 x 10 = 10.000
- Hệ số pha loãng trong ống thứ tư trong độ pha loãng chuỗi này là 1: 10.000. Nồng độ của chất sau khi pha loãng thấp hơn 10.000 lần so với trước khi nó được pha loãng.
Bước 2. Xác định nồng độ của dung dịch sau khi pha loãng
Để xác định nồng độ cuối cùng của dung dịch sau khi pha loãng chuỗi, bạn phải biết nồng độ ban đầu của nó. Công thức là Ckết thúc = Cbắt đầu/ D, Ckết thúc là nồng độ cuối cùng của dung dịch đã pha loãng, Cbắt đầu là nồng độ ban đầu của dung dịch ban đầu, và D là tỷ lệ pha loãng xác định trước.
- Ví dụ: Nếu bạn bắt đầu với dung dịch tế bào có nồng độ 1.000.000 tế bào trên mL và tỷ lệ pha loãng là 1.000, thì nồng độ cuối cùng của mẫu đã pha loãng là bao nhiêu?
-
Bằng cách sử dụng công thức:
- NSkết thúc = Cbắt đầu/NS
- NSkết thúc = 1.000.000/1.000
- NSkết thúc = 1000 tế bào trên mỗi mL.
Bước 3. Đảm bảo rằng tất cả các đơn vị đều giống nhau
Khi thực hiện bất kỳ phép tính nào, hãy đảm bảo rằng các đơn vị luôn giống nhau ở cuối phép tính. Nếu đơn vị ban đầu là ô trên mL, hãy đảm bảo rằng các đơn vị này vẫn giữ nguyên khi kết thúc phép tính. Nếu nồng độ ban đầu là phần triệu (bpd), thì nồng độ cuối cùng cũng phải tính bằng đơn vị bpj.
