Bạn đã bao giờ muốn nuôi cấy vi khuẩn cho một dự án khoa học hay chỉ để giải trí? Hóa ra là quá dễ dàng - tất cả những gì bạn cần là thạch dinh dưỡng (một thành phần tăng trưởng đặc biệt như thạch), một vài đĩa petri vô trùng và một số nguồn vi khuẩn đáng kinh tởm!
Bươc chân
Phương pháp 1/3: Chuẩn bị đĩa Petri
Bước 1. Chuẩn bị thạch
Agar là một chất giống như thạch dùng để nuôi vi khuẩn. Loại thạch này được làm từ một loại tảo đỏ cung cấp bề mặt môi trường phát triển cho nhiều loại vi khuẩn khác nhau. Một số loại thạch có chứa các chất dinh dưỡng bổ sung (chẳng hạn như máu cừu) giúp thúc đẩy sự phát triển của vi khuẩn nhanh hơn.
- Loại thạch dễ sử dụng nhất cho thí nghiệm này là thạch dinh dưỡng ở dạng bột. Bạn sẽ cần 1,2 gam (khoảng nửa thìa cà phê) bột agar cho mỗi đĩa petri 4 inch (10 cm) mà bạn muốn sử dụng.
- Trong đĩa hoặc bát cách nhiệt, trộn nửa thìa thạch dinh dưỡng dạng bột với 60 ml (khoảng 1/4 cốc) nước nóng. Tuy nhiên, hãy nhân số lượng này với số đĩa petri bạn muốn sử dụng.
- Đặt bát hoặc đĩa vào lò vi sóng và đun nhỏ lửa trong một phút, quan sát để đảm bảo rằng dung dịch không bị trào ra ngoài.
- Khi dung dịch đã sẵn sàng, bột thạch phải hòa tan hoàn toàn và chất lỏng phải trong.
- Để dung dịch thạch nguội trong vài phút trước khi tiếp tục.
Bước 2. Chuẩn bị đĩa petri
Đĩa petri là đồ đựng nhỏ có đáy phẳng bằng thủy tinh hoặc nhựa trong. Đĩa Petri có hai phần - trên và dưới - được kết nối với nhau. Điều này bảo vệ bên trong cốc khỏi không khí bị ô nhiễm không mong muốn, đồng thời loại bỏ bất kỳ khí nào do vi khuẩn tạo ra.
- Đĩa Petri phải được khử trùng kỹ lưỡng trước khi sử dụng để nuôi cấy vi khuẩn, nếu không kết quả của thí nghiệm có thể bị ảnh hưởng. Đĩa petri mới mua cần được khử trùng trước và đậy kín trong hộp nhựa.
- Lấy đĩa petri ra khỏi hộp và mở hai nửa. Thật cẩn thận, đổ dung dịch thạch ấm lên đáy đĩa petri - chỉ đủ để tạo thành một lớp dưới đáy đĩa.
- Nhanh chóng đậy nắp đĩa petri để ngăn vi khuẩn trong không khí làm nhiễm bẩn thí nghiệm. Giữ đĩa petri trong 30 phút đến 2 giờ, cho đến khi dung dịch thạch nguội và cứng lại (khi đã sẵn sàng, dung dịch thạch sẽ tương tự như Jell-O).
Bước 3. Đặt đĩa petri vào tủ lạnh cho đến khi dùng được
Nếu bạn không có kế hoạch sử dụng các đĩa petri đầy thạch ngay lập tức, chúng nên được bảo quản trong tủ lạnh cho đến khi bạn sẵn sàng tiếp tục thử nghiệm.
- Bảo quản đĩa petri trong tủ lạnh sẽ ngăn không cho nước trong đĩa bay hơi (vi khuẩn cần môi trường ẩm để phát triển). Nó cũng cho phép bề mặt thạch hơi cứng lại, ngăn không cho nó bị rách khi bạn di chuyển mẫu vi khuẩn của mình.
- Khi bảo quản đĩa petri trong tủ lạnh, chúng nên được đặt lộn ngược. Điều này ngăn chặn nước ngưng tụ trên nắp có thể rơi xuống đáy và cản trở sự phát triển của bề mặt.
- Đĩa petri chứa đầy thạch có thể được bảo quản trong tủ lạnh trong vài tháng. Khi bạn đã sẵn sàng sử dụng, hãy lấy cốc ra khỏi tủ lạnh và để cốc về nhiệt độ phòng trước khi thêm mẫu vào.
Phương pháp 2/3: Vi khuẩn phát triển
Bước 1. Đặt vi khuẩn vào đĩa petri
Khi dung dịch thạch đã đông cứng và đĩa petri ở nhiệt độ phòng, bạn đã sẵn sàng cho phần thú vị - giới thiệu vi khuẩn. Có một số cách để làm điều này - thông qua tiếp xúc trực tiếp hoặc thông qua thu thập mẫu.
-
Tiếp xúc trực tiếp:
Điều này được thực hiện khi vi khuẩn được chuyển sang đĩa petri bằng cách tiếp xúc trực tiếp, ví dụ như chạm vào thạch. Một trong những cách thường được sử dụng để tiếp xúc trực tiếp là chỉ cần ấn nhẹ đầu ngón tay của bạn (trước hoặc sau khi rửa tay) lên bề mặt thạch. Tuy nhiên, bạn cũng có thể thử ấn móng tay hoặc bề mặt của đồng xu cũ vào thạch, hoặc thậm chí đặt một sợi tóc mỏng hoặc một giọt sữa vào đĩa thạch. Sử dụng trí tưởng tượng của bạn!
- Bộ sưu tập mẫu: Bằng cách này, bạn có thể thu thập vi khuẩn từ hầu hết mọi bề mặt và chuyển chúng vào đĩa petri, tất cả những gì bạn cần là một vài chiếc tăm bông sạch. Bạn chỉ cần lấy tăm bông và lau qua bất kỳ bề mặt nào mà bạn có thể nghĩ đến - bên trong miệng, tay nắm cửa, các phím trên bàn phím máy tính hoặc các phím của điều khiển - sau đó, lau qua bề mặt thạch (không làm rách nó). Những đốm này chứa rất nhiều vi khuẩn và sẽ tạo ra kết quả thú vị (và kinh tởm) trong vòng vài ngày.
- Nếu muốn, bạn có thể cho nhiều hơn một mẫu vi khuẩn vào mỗi đĩa petri - tất cả những gì bạn phải làm là chia đĩa thành bốn phần (phần tư) và lau một mẫu vi khuẩn khác nhau ở mỗi bên.
Bước 2. Đặt tên cho nó và đóng đĩa petri
Khi bạn đã đưa vi khuẩn vào, bạn phải đóng nắp đĩa petri và cách ly nó.
- Nhớ đặt tên cho mỗi đĩa petri nguồn vi khuẩn, nếu không bạn sẽ không biết nó đến từ loại vi khuẩn nào. Bạn có thể làm điều này bằng băng dính và bút đánh dấu.
- Để phòng ngừa thêm, bạn có thể đặt mỗi đĩa petri trong một túi nhựa tiệt trùng. Điều này sẽ cung cấp sự bảo vệ bổ sung khỏi bất kỳ khuẩn lạc vi khuẩn có hại nào có thể phát triển, nhưng vẫn cho phép bạn xem thành phần bên trong đĩa petri.
Bước 3. Đặt đĩa petri ở nơi ấm áp và tối
Để đĩa petri ở nơi ấm áp và tối, nơi vi khuẩn có thể phát triển mạnh, không bị xáo trộn, trong vài ngày. Hãy nhớ cất ngược nó, để sự phát triển của vi khuẩn không bị ảnh hưởng bởi bất kỳ giọt nước nào.
- Nhiệt độ lý tưởng cho vi khuẩn phát triển là từ 70 đến 98 độ F (20-37 độ C). Nếu cần, bạn có thể đặt đĩa petri ở nơi mát hơn, nhưng vi khuẩn sẽ phát triển chậm hơn nhiều.
- Để vi khuẩn phát triển trong 4-6 ngày, vì điều này sẽ có đủ thời gian để nuôi cấy phát triển. Một khi vi khuẩn bắt đầu phát triển, bạn có thể nhận thấy mùi hôi phát ra từ đĩa petri.
Bước 4. Ghi lại kết quả của bạn
Sau một vài ngày, bạn sẽ thấy các loại vi khuẩn, nấm và nấm khác nhau phát triển trong mỗi đĩa petri.
- Sử dụng một cuốn sổ để ghi lại những quan sát của bạn về thành phần của mỗi đĩa petri và có thể suy ra những nơi có nhiều vi khuẩn nhất.
- Nó có trong miệng của bạn không? Tay nắm cửa? Các nút trên điều khiển từ xa của bạn? Các kết quả có thể làm bạn ngạc nhiên!
- Nếu muốn, bạn có thể đo sự phát triển hàng ngày của các khuẩn lạc vi khuẩn bằng cách sử dụng một điểm đánh dấu để theo dõi một vòng tròn xung quanh mỗi khuẩn lạc ở đáy đĩa petri. Sau một vài ngày, bạn sẽ có một bộ sưu tập các vòng tròn đồng tâm ở dưới cùng của đĩa petri.
Bước 5. Kiểm tra hiệu quả của chất kháng khuẩn
Một biến thể thú vị trong thí nghiệm này là cho chất kháng khuẩn (nước rửa tay, xà phòng, v.v.) vào đĩa petri để kiểm tra hiệu quả của nó.
- Sau khi bạn đã đặt vi khuẩn vào đĩa petri, hãy sử dụng tăm bông để nhỏ một giọt gel rửa tay, xà phòng khử trùng hoặc thuốc tẩy gia dụng lên tâm mẫu vi khuẩn, sau đó tiếp tục thí nghiệm như bình thường.
- Khi vi khuẩn trong bát đĩa phát triển, bạn sẽ thấy một vòng hoặc "quầng" xung quanh nơi bạn đặt chất kháng khuẩn, nơi không có vi khuẩn nào phát triển. Nơi này được biết đến với cái tên "vùng rõ ràng" (hay chính xác hơn là "vùng ức chế").
- Bạn có thể đo lường hiệu quả của các chất kháng khuẩn khác nhau bằng cách so sánh kích thước của vùng rõ ràng trong mỗi đĩa petri. Vùng thông thoáng càng rộng thì chất kháng khuẩn càng hiệu quả.
Phương pháp 3/3: Loại bỏ vi khuẩn một cách an toàn
Bước 1. Thực hiện các biện pháp phòng ngừa thích hợp
Trước khi cố gắng vứt bỏ đĩa petri, trước tiên bạn cần thực hiện các biện pháp phòng ngừa thích hợp.
- Mặc dù hầu hết các vi khuẩn bạn phát triển là vô hại, nhưng các đàn vi khuẩn lớn có thể gây ra nguy cơ lớn hơn - vì vậy bạn cần phải tiêu diệt chúng trước khi xử lý chúng bằng thuốc tẩy gia dụng.
- Bảo vệ tay bạn khỏi thuốc tẩy bằng cách đeo găng tay cao su, bảo vệ mắt bằng kính nhựa phòng thí nghiệm và bảo vệ quần áo của bạn bằng cách đeo tạp dề.
Bước 2. Đổ thuốc tẩy vào đĩa petri
Mở đĩa petri và cẩn thận đổ một lượng nhỏ thuốc tẩy lên khu vực vi khuẩn, giữ đĩa trên bồn rửa. Điều này sẽ tiêu diệt vi khuẩn.
- Hãy cẩn thận không để thuốc tẩy tiếp xúc với da của bạn, vì nó sẽ làm bỏng da của bạn.
- Sau đó, đặt đĩa petri đã khử trùng trở lại hộp nhựa tiệt trùng và vứt vào thùng rác.
